Набор реагентов для выявления антигена Helicobacter pylori в кале

Инструкция по применению медицинского изделия для диагностики in vitro Набор реагентов для выявления антигена Helicobacter pylori в кале методом иммунохроматографического анализа по ТУ 20.59.52-005-01072088-2019, «Экспресс-тест «H.pylori Ag»

Внимательно ознакомьтесь с представленной информацией. Она необходима для  правильного использования экспресс-теста.

 

Наименование медицинского изделия

Набор реагентов для выявления антигена Helicobacter pylori в кале методом иммунохроматографического анализа по ТУ 20.59.52-005-01072088-2019, «Экспресс-тест «H.pylori Ag»

В составе: тест-кассета – 1 шт.; пробирка для отбора образцов  – 1 шт.; бумага для сбора кала – 1 шт.; инструкция по применению – 1 шт. 

Далее по тексту – Экспресс-тест.

Производитель

Общество с ограниченной ответственностью «БИОХИТ» (ООО «БИОХИТ»)

Назначение медицинского изделия

Экспресс-тест предназначен для качественного иммунохроматографического экспресс-анализа для выявления Helicobacter pylori в кале; является вспомогательным средством в диагностике.

Профессиональный уровень потенциальных пользователей: непрофессионал (лицо, не имеющее формального образования в соответствующей области или дисциплине); профессионал (персонал, имеющий квалификацию для выполнения диагностических исследований in vitro в результате специального образования и обучения).

Показания к применению

- подозрение на инфекцию, вызванную Helicobacter pylori.

Противопоказания к применению, возможные побочные воздействия

Не выявлены.

Исследование кала на Helicobacter pylori проводится у населения всех возрастных групп при наличии показаний к применению Экспресс-теста.

Общее описание

Экспресс-тест представляет собой набор для проведения анализа за короткое время по сравнению со стандартными лабораторными процедурами исследований.

Функциональные характеристики

Аналитическая чувствительность (предел обнаружения): 5 нг/мл (наименьшее содержание аналита в пробе, при котором он может быть обнаружен). Установлена в результате испытаний, в ходе которых исследовались образцы с концентрацией H.pylori от 0 до 25 нг/мл;

Хук-эффект: должен отсутствовать в концентрации (<200 нг/мл) аналита в образцах. Установлен в результате испытаний, в ходе которых исследовались образцы с концентрацией H.pylori от 50 до 200 нг/мл;

Референтный материал: Для определения (подтверждения) качественных свойств Экспресс-теста используется материал с установленной пригодностью для применения по своему предназначению.

Время достижения устойчивого показателя результата: 10-20 мин. Установлено в результате испытаний, в ходе которых результаты считывались через различные промежутки времени;

Аналитическая специфичность: 100%. Определяется антигенной специфичностью H.pylori, а также  испытаниями, в ходе которых исследовалась интерферирующие вещества (потенциально встречающиеся в образцах кала в норме и при приеме некоторых лекарственных средств, в следующих концентрациях: аскорбиновая кислота 2 мг/мл; железо 20 мг/мл; глюкоза 20 мг/мл; альбумин 20 мг/мл.,  антибиотики, разведенные в соответствии с инструкциями по применению: амоксициллин,  цефтриаксон, доксициклин,  кларитромицин, образцы гемоглобина в разной концентрации (25, 50, 100,500, 1000 мкг/л),  антигены возбудителей инфекционных заболеваний кишечной группы (потенциально встречающиеся в образцах кала пациентов с подозрением на заболевания желудочно-кишечного тракта, разведенные в соответствии с инструкциями по применению (концентрация 5*10⁵КОЭ/мл): Escherichia coli штамм NCTC 8164; Enterococcus faecalis штамм NCTC 12697; Shigella dysenteriae штамм NCTC 9760); Rotavirus (штамм SA11); Proteus vulgaris (штамм NCTC 4175); Staphylococcus aureus (штамм NCTC 8532). В результате испытаний было установлено, что наличие микроорганизмов в кале (Shigella dysenteriae(10⁵ – 10⁸ КОЭ/г фекалий),  Escherichia coli (10¹² – 10¹⁴ КОЭ/г фекалий)), изменения его физического и химического состава, наличие патологических включений (изменение рН ниже 6 и выше 8,наличие слизи, белка, билирубина, жирных кислот, мышечных волокон, лейкоцитов, а также при положительной реакции на скрытую кровь) не влияет на результат анализа. неспецифических реакций (ложноположительных) при использовании экспресс-теста «H.pylori Ag»  не выявлено.

Воспроизводимость / повторяемость: не менее 95% / 100%.

Диагностическая чувствительность: 98,4% (95% ДИ 97,1% - 99,7%).

Диагностическая специфичность: 100 % (95% ДИ 99,1% - 100,0%).

Референтный метод: Оценка эффективности и безопасности осуществляется при непосредственном сопоставлении с данными, полученными при проведении референтной методики на аттестованных современных изделиях. Используемое для сравнения изделие должно быть зарегистрировано в установленном порядке на территории РФ. Для контроля качества теста рекомендуется использовать охарактеризованный по содержанию антигена H.pylori материал.

Принцип метода

Иммунохроматографический экспресс-анализ. Нанесенная проба движется по тест-полоске через подушечку (с нанесенными частицами золота, рекомбинантными мышиными IgG мечеными биотином и подвижными моноклональными мышиными антителами к H.pylori) к тестовой зоне «Т» (с нанесенными моноклональными мышиными антителами к H.pylori со стрептавидином для усиления окрашивания в тестовой зоне). При наличии в образцах кала антигенов H.pylori, происходит их реакция со специфическими меченными моноклональными антителами, формируется комплекс антиген-антитело, который движется по мембране, образуя цветную полоску в тестовой зоне, что оценивается как положительный результат.  Отсутствие цветной полоски указывает на отрицательный результат – отсутствие антигенов H.pylori в образцах кала. Далее проба движется к контрольной зоне «С» (с нанесенными поликлональными козьими антителами к мышиным IgG). Выступая в качестве процедурного контроля, появление цветной полоски в контрольной зоне «С» наступает всегда, свидетельствуя о нанесении пробы в надлежащем объеме и ее правильном распределении.

Технические характеристики

Экспресс-тест представляет собой набор, состоящий из: тест-кассеты – 1 шт.; пробирки для отбора образцов  – 1 шт.; бумаги для сбора кала – 1 шт.; инструкции по применению – 1 шт.

Тест-кассета упакована в герметично запаянный многослойный фольгированный влагостойкий пакет. В пакет должна быть вложена упаковка с влагопоглощающими адсорбент-гранулами. Тест-кассета, пробирка для отбора образцов, бумага для сбора кала и инструкция по применению должны быть упакованы в прозрачный пакет типа Zip-Lock. Экспресс-тест в пакете Zip-Lock должен быть упакован в коробку из картона (или Экспресс-тесты в пакетах Zip-Lock в количестве 30 штук должны быть упакованы в коробку из картона).

Тест-кассета представляет собой плоскую коробку прямоугольной формы белого цвета с иммунохроматографической тест-полоской внутри.

Пробирка для отбора образцов представляет собой флакон-капельницу с 1 мл буферного раствора.

Бумага для сбора кала представляет собой лист бумаги с нанесенным вдоль двух сторон клейким слоем.

Один набор рассчитан на выполнение одного экспресс-анализа.

Дополнительный перечень материалов, которые требуются для проведения тестирования (не содержатся в наборе медицинского изделия)

- одноразовые перчатки;

- устройство для отсчета времени.

Реагенты, применяемые в Экспресс-тесте

При производстве Экспресс-теста применяются: Мышиные IgG, подвижные моноклональные мышиные антитела к антигенам H.pylori; моноклональные мышиные антитела к антигенам H.pylori; поликлональные козьи антитела к мышиным IgG; буферный раствор (5-хлор-2-метил-4- изотиазолин-3-он, 2-метил-2H -изотиазол-3-он, модифицированный алкилированный карбоксилат (рН 8,5 – 9,6), азид натрия ≤0,1 %).

Предупреждения, меры предосторожности и ограничения

1. Экспресс-тест должен применяться согласно настоящей Инструкции по применению;
2. Экспресс-тест является качественным анализом;
3. Экспресс-тест не позволяет определить ни количественное значение, ни скорость увеличения концентрации антигенов H.pylori;
4. При работе с Экспресс-тестом всегда надевайте одноразовые перчатки, так как Экспресс-тест не предназначен для использования в непосредственном контакте с организмом человека и при анализе задействуются образцы биоматериала человека, которые следует рассматривать как потенциально инфицированные;
5. Перед вскрытием довести пакет с Экспресс-тестом до комнатной температуры (20 ±5°С). В противном случае возможно получение недостоверного результата.
6. Использование Экспресс-теста не требует каких-либо предварительных ограничений пищевого рациона;
7. Экспресс-тест позволяет определить наличие H.pylori в пробе и не должна рассматриваться как единственная причина для классифицирования H.pylori этиологическим агентом язвы желудка или двенадцатиперстной кишки;
8. В случае получения отрицательного результата при сохранении клинических симптомов, рекомендуется провести дополнительные анализы с применением иных клинических методов. Отрицательный результат ни в коем случае не исключает наличия H.pylori;
9. После лечения антибиотиками концентрация антигенов H.pylori может опускаться ниже минимального уровня выявления теста. Таким образом, в ходе лечения антибиотиками к постановке диагноза следует отнестись с особой осторожностью;
10. Экспресс-тест относится к медицинским изделиям, при применении которых терапевтическое решение должно приниматься после проведения дальнейших исследований. ;
11. При проведении тестирования самостоятельно пациентом, полученный результат следует сообщить врачу (результаты самотестирования необходимо записывать в тетрадь (журнал пациента) и показывать их врачу при каждой консультации – это облегчает оценку врачом общего качества ведения терапии). Недопустимо по результатам тестирования принимать решения медицинского характера самостоятельно пациентом без предварительной консультации с врачом. Самотестирование дополняет наблюдение врачом, но не заменяет его;
12. Буферный раствор содержит консервант (азид натрия менее 0,1%) – избегать контакта с глазами, кожей и проглатывания. Не принимать внутрь! Хранить в недоступном для детей месте! При попадании на кожу или в глаза – промыть большим количеством воды. При необходимости, в т.ч. при проглатывании, обратиться за медицинской помощью.
13. Экспресс-тест предназначен только для однократного применения, ремонту и техническому обслуживанию не подлежит;
14. Изделия с истекшим сроком годности применению не подлежат.
15. Документ о качестве (паспорт) размещается на официальном сайте производителя или предоставляется потребителю по запросу.

Всегда соблюдайте требования настоящей Инструкции по применению, предупреждения и меры предосторожности.

Анализируемые пробы

Вид анализируемого биологического материала: образцы кала человека.

Ограничения по использованию анализируемого материала: избыточное количество образца может повлечь за собой получение некорректных результатов (появление коричневой полосы). В таком случае следует скорректировать количество отбираемого образца кала и провести повторное тестирование; не использовать Экспресс-тест при жидком стуле.

Условия возможного хранения анализируемых образцов биологического материала: наилучших результатов позволяет добиться проведение анализа в течение 6 часов после сбора. В противном случае собранные пробы могут храниться при температуре от 2 до 8°C в течение 3 суток.

Процедура тестирования

Перед проведением процедуры тестирования:

- Наденьте одноразовые перчатки;

- Внимательно прочитать настоящую инструкцию по применению;

- Визуально проверить наличие повреждений пакета с тест-кассетой, проверить наличие значимых повреждений, трещин, отверстий и инородных субстанций на пробирке для сбора образцов. Не использовать Экспресс-тест в случае их обнаружения;

- Перед вскрытием довести пакет с Экспресс-тестом до комнатной температуры (20 ±5°С). Тест-кассета извлекается из пакета непосредственно перед проведением теста.

Проведение процедуры тестирования:

1. Собрать кал при помощи входящей в набор бумаги для сбора кала или в чистый сухой контейнер;
2. Отвинтить крышку пробирки зелёного цвета и извлечь аппликатор. Произвольно погрузить аппликатор в кал, по меньшей мере, в трех разных участках. Не зачерпывать пробу кала;
3. Поместить аппликатор обратно в пробирку и плотно завинтить крышку, затем тщательно перемешать отобранные образцы с буферным раствором путем встряхивания пробирки. Подождать 2 минуты;
4. Вскрыть пакет и извлечь тест-кассету (при проведении экспресс-анализа в учреждениях медицины и здравоохранения следует промаркировать тест-кассету идентификатором пациента);
5. Установите тест-кассету на ровную горизонтальную поверхность, не перемещайте и не трясите тест-кассету во время экспресс-анализа;
6. Удерживая пробирку в вертикальном положении, отвинтить прозрачный колпачок. Перевернуть пробирку и удерживая в вертикальном положении выдавить две полных капли пробы в расположенную на тестовой кассете лунку для нанесения пробы «S» (избегать образования в лунке для нанесения пробы «S» воздушных пузырьков);
7. Засечь время. Считать результат через 10 минут. Временной интервал между нанесением проб и считыванием результатов должен составлять 10-20 минут. По истечении 20 минут результат считыванию не подлежит;
8. В случае проведения тестирования самостоятельно пациентом – сообщите врачу о полученном результате.

 

Считывание и интерпретация результатов:	Иллюстрация проведения экспресс-анализа:
Положительный результат. Проявляются две окрашенные полосы любой интенсивности – в контрольной зоне «С» и в тестовой зоне «Т».     Отрицательный результат. Проявляется только одна окрашенная полоса любой интенсивности – в контрольной зоне «С».       Недействительный результат. Не проявляется цветная полоса в контрольной зоне «С». В таком случае следует провести повторное тестирование.

Срок годности

24 месяца. Срок годности указан на упаковке.

Транспортирование и хранение

1. Транспортирование Экспресс-теста допускается производить при температуре от 2 до 30°С;
2. Хранить в защищенном от влаги и света месте, избегать складирования вблизи отопительных приборов;
3. Избегать деформации и повреждения упаковки;
4. После вскрытия Экспресс-тест хранению не подлежит;
5. Хранить в недоступном для детей месте;
6. Хранить при температуре от 2 до 30°С;
7. Замораживание Экспресс-теста не допускается.

Контроль качества

В конструкции изделия производителем предусмотрена встроенная контрольная система, которая способность устанавливать возможные неисправности и предупреждать пользователя о необходимости корректирующих действий. В её качестве выступает цветная полоска, появляющаяся в контрольной зоне «C», появление которой подтверждает нанесение пробы в достаточном объеме и правильность выполнения процедуры тестирования. Данная  встроенная контрольная система способна потенциально снизить или даже исключить необходимость для пользователей исследовать контрольные пробы для мониторинга качества функционирования изделия. В этой связи в комплект настоящего набора не входят стандартные контрольные образцы, тем не менее, для профессиональных пользователей, в соответствии с требованиями надлежащей лабораторной практики, с целью подтверждения качества функционирования изделия рекомендуется выполнить тестирование аттестованных положительных и отрицательных контрольных образцов. Для осуществления ежедневного контроля качества изделия могут использоваться контрольные материалы, зарегистрированные в установленном порядке на территории РФ.

Утилизация

Утилизировать в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10. Использованные тест-кассеты, использованные пробирки с буфером для разведения, образцы крови, плазмы и сыворотки крови и другие материалы, с которыми имелся контакт биологических жидкостей, должны быть обработаны и утилизированы так же, как если бы они были потенциально инфицированы – как медицинские отходы класса Б. Неиспользованные тест-кассеты, индивидуальная упаковка тест-кассет, а также коробка и инструкция утилизируются как отходы класса А. Неиспользованный буфер для разведения утилизируется как отходы класса Г.

Ограничение ответственности

Производитель не несет ответственность в случае применения изделия без соблюдения требований настоящей Инструкции по применению.

Производитель не несет ответственность за возможный прямой, косвенный, случайный ущерб или расходы, возникающие в связи с использованием изделия при нарушении условий хранения, транспортировки и использования, при нарушении целостности упаковки.

В случае наступления нежелательных/неблагоприятных событий связанных с применением настоящего медицинского изделия необходимо сообщить о таком событии производителю: ООО «БИОХИТ»

 

1.Хэйзелл С.Л и др. Кампилобактерный пилорит и гастрит I степени: выявление уреазы как маркера микробной колонизации и гастрита. Американский журнал гастроэнтерологии. (1987), 82(4): 292-96. (Hazell, SL, et al. Campylobacter pyloridis and gastritis I: Detection of urease as a marker of bacterial colonization and gastritis. Amer. J. Gastroenterology. (1987), 82(4): 292-96.)

2.Катлер А.Ф. Анализ на Helicobacter pylori в клинической практике. Американский журнал медицины. 1996; 100:35S-41S. (Cutler AF. Testing for Helicobacter pylori in clinical practice. Am j. Med. 1996; 100:35S-41S.)

3.Ананд Б.С., Раэд A.K., Малати Х.M. С и др. Нижний предел распространенности язвы желудка у нормальных индивидуумов, пораженных хеликобактерной инфекцией. 1996,91:1112-1115. (Anand BS, Raed AK, Malaty HM, et al. Loe point prevalence of peptic ulcer in normalindividual with Helicobacter pylori infection. Am J Gastroenterol.

4.Sipponen P, Graham D. Importance of atrophic gastritis in diagnostics and prevention of gastric cancer: application of plasma biomarkers. Scand J Gastroenterol 2007;42:2-10.

5.Calvet X, Lario S, Ramirez-Lazaro MJ, et al. Accuracy of monoclonal stool tests for determining cure of Helicobacter pylori infection after treatment. Helicobacter 2010;15:201.

6.Agréus L, Kuipers EJ, Kupcinskas L, Malfertheiner P, Di Mario F, Leja M, Mahachai V, Yaron N, van Oijen M, Perez Perez G, Rugge M, Ronkainen J, Salaspuro M, Sipponen P, Sugano K, Sung J. Rationale in diagnosis and screening of atrophic gastritis with stomach-specific plasma biomarkers. Scand J Gastroenterol 2012;47:136-147.

7.de Korwin JD. Epidemiology of Helicobacter pylori infection and gastric cancer. 2014 Feb;64(2):189-93.

8.Verónica Castillo-Montoya, Eduardo Ruiz-Bustos, Mauro Eduardo Valencia-Juillerat, Gerardo Álvarez-Hernández, Norberto Sotelo-Cruz / Detection of Helicobacter pylori in children and adolescents using the monoclonal coproantigen immunoassay and its association with gastrointestinal diseases// Cirugía y Cirujanos (English Edition), Vol. 85, I. 1, 2017, P. 27-33.

9.И.В.Маев, Д.Н. Андреев, Д.Т. Дичева, Ю.А. Кучерявый и др./ Диагностика и лечение инфекции Helicobacter pylori: Положения консенсуса Маастрихт V (2015 г.)//Архив внутренней медицины, №2, 2017, стр. 85-94.

10.Ji-Hyun Seo, Ji-Sook Park, Kwang-Ho Rhee*, and Hee-Shang Youn/Diagnosis of Helicobacter pylori Infection in Children and Adolescents in Korea// Pediatr Gastroenterol Hepatol Nutr 2018 October 21(4):219-233.

 

Символы, применяемые при маркировке изделия

Символ	Описание		Символ	Описание		Символ	Описание
	Производитель			Дата изготовления: год, месяц			Не допускать воздействие солнечного света
	Номер серии			Каталожный номер			Беречь от влаги
	Температура хранения:  от 2 до 30°С			Медицинское изделие для  in vitro диагностики			Для однократного применения
	Срок годности изделия: год, месяц включительно			Обратитесь к инструкции по применению			Не использовать при повреждении упаковки
	Осторожно! Обратитесь к инструкции по применению